根瘤菌质粒的快速检测

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DOC版25实验材料ⅠPA液体培养基：蛋白胨4g、MgSO4•7H2O5g、dH2O（蒸馏水）1000mL、pH6.8—7.0。TY固体培养基：胰蛋白胨5g、酵母粉3g、CaCl2•6H2O1.3g、dH2O1000mL、pH7.0。10XTBE电泳缓冲液：Tris108g、H3BO355g、EDTA9.3g、dH2O1000mL、pH8.3。Tris-蔗糖溶液：蔗糖25g、0.025mol•L-1Tris-HCl（pH8.0）100mL、高压灭菌后40C保存。RNA酶缓冲液：Tris-HCl（pH7.5）10mmol、NaCl15mmol、高压灭菌后40C保存。实验材料ⅡRNA酶溶液：RNA酶（RibonucleaseA，Sigma公司产品）4mg、RNA酶缓冲液10mL、分装于小管中，1000C水浴中处理15min以灭活DNA酶，-200C保存。溶菌酶溶液：溶菌酶（Lysoxyme，Sigma公司产品）100mg、灭菌双蒸水（d2H2o）5mL、分装于小管中，每管50L，-200C保存。裂解液（临用前配制）：Tris-蔗糖1mL（用后归于40C）、溶菌酶溶液（20mg/mL）50L、RNA酶溶液（400g/mL）50L、溴酚蓝指示剂1—2滴。实验材料Ⅲ溴酚蓝指示剂：溴酚蓝0.25g、蔗糖40g、dH2O100mL、配后存于40C备用。10SDS：SDS10g、dH2O100mL。SDS琼脂糖凝胶：0.65琼脂糖凝胶2mL、10SDS0.35mL、1XTBE1.15mL、溴酚蓝指示剂1滴。溴化乙锭染色剂：溴化乙锭100mg、dH2O100Ml。避光保存，因溴化乙锭是诱变剂，配制时要带手套，避免与皮肤接触。，大小：58.0 KB